Purificación de ADN en sílice: ¿cómo se pega y se libera? | FP
¿Cómo se une el ADN a la sílice si ambas superficies pueden tener carga negativa? Descubre el fundamento de la cromatografía de adsorción y sigue, paso a paso,
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Objetivos
En este vídeo aprenderás
- Ya hemos aprendido a extraer el ADN de las células. Pero una vez que rompemos sus membranas, obtenemos un…
- Es decir, tenemos el ADN que buscamos, pero todavía está mezclado con muchas sustancias que pueden interf…
- Exactamente. Por eso necesitamos purificarlo. Y hoy vamos a conocer uno de los métodos más utilizados en …
- ¿Cromatografía de adsorción? ¿Eso significa que el ADN se queda pegado a algo?
Sobre este vídeo
¿Cómo se une el ADN a la sílice si ambas superficies pueden tener carga negativa? Descubre el fundamento de la cromatografía de adsorción y sigue, paso a paso, la purificación de ADN mediante columnas de sílice.
Una explicación visual a dos voces para alumnado de Formación Profesional de laboratorio, biología molecular y biotecnología.
En este vídeo aprenderás:
• Qué son las capas de hidratación del ADN y de la sílice.
• Cómo las sales caotrópicas favorecen la adsorción, modificando el entorno acuoso y apantallando las cargas.
• Qué papel tienen el cloruro de guanidinio y el tiocianato de guanidinio.
• La diferencia entre adsorción y absorción.
• Cómo se carga la columna y dónde queda retenido el ADN.
• Para qué sirve el lavado con etanol y por qué hay que retirar sus restos.
• Cómo se recupera el ADN mediante elución con agua libre de nucleasas o tampón TE.
• Qué funciones cumplen el Tris y el EDTA.
Recuerda: durante la carga y los lavados conservamos la columna y descartamos el líquido del tubo colector. Después de la elución, conservamos el líquido con ADN recogido en el Eppendorf limpio.
Las cargas negativas del ADN no desaparecen: cambian las condiciones de hidratación y las interacciones entre las superficies.
El etanol al 70 % y la incubación de 3–5 minutos se presentan como ejemplos de las diapositivas del curso. Las condiciones concretas deben ajustarse al protocolo utilizado.
Al final repasamos el procedimiento y comprobamos lo aprendido con preguntas.
Docente: Sonia Carques
EduConsciencia.com
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