Enzimas de restricción: digestión y análisis del ADN lambda por electroforesis
Cómo cortan las enzimas de restricción el ADN lambda y cómo leer el patrón de bandas en un gel de agarosa.
Módulo:Biología Molecular y Citogenética
Tema:PCR y electroforesis
El vídeo se reproduce desde YouTube mediante su reproductor oficial. Ver en YouTube
Objetivos
En este vídeo aprenderás
- Qué es una enzima de restricción y qué es un sitio de restricción
- Por qué cada enzima genera un patrón de fragmentos distinto
- Cómo se prepara una digestión enzimática correctamente
- Para qué sirve el marcador de peso molecular en el gel
- Cómo se interpreta un patrón de bandas del ADN lambda
- Qué diferencia hay entre una digestión completa y una parcial
Sobre este vídeo
Las enzimas de restricción son las tijeras moleculares del laboratorio: reconocen una secuencia concreta de ADN y cortan ahí, siempre en el mismo punto. En este vídeo vemos, dibujado paso a paso, cómo se prepara una digestión del ADN del fago lambda y qué ocurre después en el gel de agarosa.
Empezamos entendiendo qué es un sitio de restricción y por qué cada enzima genera un número distinto de fragmentos. Después preparamos la reacción: ADN diana, enzima, tampón y temperatura de incubación, con los controles que evitan falsos resultados. Terminamos cargando el gel, aplicando la corriente y analizando el patrón de bandas.
La parte más útil es la interpretación: por qué aparecen las bandas donde aparecen, para qué sirve el marcador de peso molecular y cómo distinguir una digestión completa de una parcial. Si estás preparando la práctica de laboratorio, aquí tienes el fundamento completo para entender lo que vas a hacer con las manos.
Conceptos clave
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